现在国内所有二级以上归纳医院都具备了核酸检测能力，大部分医院也设立了PCR实验室，高强度的核酸检测使命已然成为了咱们查验人的作业常态，但是，假如一旦呈现试验室污染，或许会形成假阳性成果，导致成果不可信，甚至或许会危及试验室作业人员安全。

应对核酸检测试验室污染的最好办法就是防范于未然，今天咱们就带咱们了解一下试验中咱们怎么防止和减少污染的发生以及处理污染。

一、污染的发生

    在新冠病毒核酸检测过程中，常见以下几种污染类型:扩增片段的污染(产品污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(储存液或作液)以及样本间穿插污染。核酸检测试验室污染的首要来历是扩增产品的污染。

试验室应通过以下途径及时发现污染:

1.选用每次检测过程至少3个阴性对照随机置于临床样本中心参加提取全过程。

2.每天对实验室室内空气进行采样监测。空气监测规模应至少应包含样本制备区和扩增产品剖析区。

3.定期对试验室台面门把手、仪器设备外表进行取样监测。

4.阳性样本选用另外一到两种更为活络且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始样本进行复核检测。

二、污染的防控

01

严厉实施试验室各功能分区

原则上新冠病毒核酸检测试验室应当设置以下区域:试剂储存和预备区、样本制备区、扩增和产品剖析区。

根据运用仪器的功能，区域可适当合并。各区域在物理空间上应当是彻底相互独立的。传递窗满意密封性要求，不能有空气的直接相通 各项

检测作业应严厉按相应规定在各自的区域内进行，严禁在样本制备区制造试剂。

各区的功能是:

1、试剂储存和预备区:储存试剂的制备、试剂的分装和扩增反响混合液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的储存和预备。2样本制备区:转运箱的敞开，样本的灭活(适用时)，核酸提取及其参加至扩增反响管等。3 扩增和产品剖析区:核酸扩增和产品剖析区。

02

确保试验室人、物及空气单向活动

核酸检测试验室的人、物及空气流向依照试剂储存和预备区→样本制备区→扩增和产品剖析区，防止扩增产品随人流物流及空气进入扩增前

的区域。空气流向应依照从试剂储存和预备区→样本制备区→扩增区→扩增产品分听区方向空气压力递减的方式进行。

03

试验室检测安全办理(1)基本要求

核酸检测应当在生物安全二级试验室进行，并应在生物安全危险评价的根底上 采纳适当的个体防护办法，包含手套、口罩和阻隔衣等。展开

新冠病毒核酸检测的试验室应当制定试验室生物安全相关程序文件及试验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序，并有记载。

(2)试验室做试验前安全要求

应运用02%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地上消毒。消毒液需每天新鲜制造，不超过24小时。转运至试验室的标本转运桶应在生物安全柜内敞开。转运桶敞开后，运用02%含氯消毒剂或75%酒精对转运桶内壁利标本收集密封袋进行喷洒消毒。取出标本收集管后，应首要检

查标本管外壁是否有破损、管口是否走漏或是否有管壁残留物。承认无渗漏后，引荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦洗消毒样品管外外表(此处不主张

运用75%酒精，以免损坏标本标识)。如发现渗漏应当即用吸水纸掩盖，并喷洒有用氯含量为055%的含氯消毒剂进行消毒处理，不得对标本持续

检测操作，做好标本不合格记载后需当即进行密封打包，压力蒸汽灭菌处理后销毁

如为采样管为非灭活管，试验室操作人员在进行标本热灭活时，温浴前需旋紧标本收集管管盖，必要时可用封口膜密闭管盖;温浴过程中可每隔10分钟将标本轻柔摇匀1次，以确保标本均匀灭活温浴后标本需静置至室温至少10分钟使气溶胶沉降，随后再开盖进行后续核酸提取。

(3)核酸提取和检测安全要求

在进行核酸提取和检测时应尽或许在生物安全柜内进行操作。如为翻开标本管盖或其他有或许发生气溶胶的操作，则有必要在生物安全柜内进行。

(4)试验室操作完毕后清洁要求。

需求对试验室环境进行清洁，消除或许的核酸污染。

①试验室空气清洁。试验每次检测完毕后，可选用房间固定和/或可移动的紫外灯进行紫外照射2小时以上，必要时可选用核酸清除剂等试剂清除试验室残留的核酸。

②作业台面清洁。每天试验后，运用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行台面、地上清洁。

③生物安全柜消毒。试验运用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中，包扎后运用02%含有用消毒液或75%酒精喷洒消毒其外外表。消毒后将垃圾袋带出生物安全柜放入试验室废弃物转运袋中。试管架试验台面移液器等运用75%酒精进行擦洗。随后关闭生物安全柜，紫外灯照射30分钟。

④转运容器消毒。转运及寄存标本的容器运用前后需运用02%含氯消毒剂或75%酒精进行擦洗或喷洒消毒。⑤塑料或有机玻璃原料物品清洁:运用02%含氯消毒剂或过氧乙酸或过氧化氢擦洗或喷洒。(5)转运容器消毒

转运及寄存样本的容器运用前后需运用有用氯含量为02%的消毒剂或75%酒精进行擦洗或喷洒消毒。04

强化试验室检测过程控制

试验室接到样本后，应当在生物安全柜内对样本进行清点核对。依照标准操作程序进行试剂预备样本处理、核酸提取、核酸扩增、成果剖析

及陈述。试验室应当建立可疑样本和阳性样本复检的流程。

(1)试剂预备

 取试

应当挑选国家药品监督办理部门同意的试剂，并在挑选样本采样管和核酸提取试剂时，运用试剂盒阐明书上主张的配套样本采样管和提剂。

(2)样本灭活

现已运用含肌盐的灭活型样本采样管的试验室，这一环节无需进行灭活处理，直接进行核酸提取。运用非灭活型样本采样管的试验室 可选用

56℃孵育30分钟热灭活的处理方式。

(3)核酸提取

将灭活后的样本取出，在生物安全柜内翻开样本采样管加样。核酸提取完成后，当即将提取物进行封盖处理。在生物安全柜内将提取核酸

至PCR扩增反响体系中。

(4)核酸扩增

将扩增体系放入扩增仪，核对扩增程序是否与试剂阐明书相符发动扩增程序。扩增后的反响管不要开盖，直接放于垃圾袋中，封好袋口。一般医疗废物转移出试验室处理。

三、污染的消除

试验室一旦发生污染，检测作业应当即停止，直到承认消除污染后才能重新开始检测。首要，要查找污染源和清晰污染规模。然后，根据染源和污染规模采纳有用的去污染办法，结合各种不同办法以到达最佳效果。

试验室污染的处理:

1标本污染生物安全柜的操作台形成限制污染时

当即用吸水纸掩盖，并运用0.55%含氨消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需求现用现配，24小时内运用。

2标本倾覆形成试验室污染时:

坚持试验室空间密闭，防止污染物分散。当即运用潮湿有055%含氯消毒剂的毛巾掩盖污染区。必要时(如很多溢撒时)可用过氧乙酸加热票

试验室，剂量为2g/m3，熏蒸过夜或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8ml/m3，效果1-2小时;必要时或用高锰酸钾-甲醛熏蒸 高

锰酸钾8g/m3，放入耐热耐腐蚀容器(陶罐或玻璃容器)，后参加甲醛(40%)10ml/m3熏蒸4小时以上。熏蒸室内湿度60%-80%。

3整理污染物时:

严厉遵从活病毒生物安全操作要求，选用压力蒸汽灭菌处理，并进行试验室换气等，防止次生损害。一套合格的试验室规划，不外乎以下三点试验室建造

四、试验室布局规划

1、试验室的布局是否合理对教育和科研作业的效果有着直接的联系。试验室(大楼)的布局应有利于教育和科研作业，有利于学科的开展，有利

干各部门的协作，有利干归纳利用和“三废”处理。试验室(大楼)布局的好坏，长时间影响它的作业效率和经济性。

2、试验室的布局是否具有灵活性扩展性

1)还要考虑详细试验作业的特点和要求，使之具有契合需求的试验室运用面积和空间。例如，试验室的高度，要事先考虑到能装置、搬运大型设备。(3)核酸提取

将灭活后的样本取出，在生物安全柜内翻开样本采样管加样。核酸提取完成后，当即将提取物进行封盖处理。在生物安全柜内将提取核酸

至PCR扩增反响体系中。

(4)核酸扩增

将扩增体系放入扩增仪，核对扩增程序是否与试剂阐明书相符发动扩增程序。扩增后的反响管不要开盖，直接放于垃圾袋中，封好袋口。一般医疗废物转移出试验室处理。

三、污染的消除

试验室一旦发生污染，检测作业应当即停止，直到承认消除污染后才能重新开始检测。首要，要查找污染源和清晰污染规模。然后，根据染源和污染规模采纳有用的去污染办法，结合各种不同办法以到达最佳效果。

试验室污染的处理:

1标本污染生物安全柜的操作台形成限制污染时

当即用吸水纸掩盖，并运用0.55%含氨消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需求现用现配，24小时内运用。

2标本倾覆形成试验室污染时:

坚持试验室空间密闭，防止污染物分散。当即运用潮湿有055%含氯消毒剂的毛巾掩盖污染区。必要时(如很多溢撒时)可用过氧乙酸加热票

试验室，剂量为2g/m3，熏蒸过夜或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8ml/m3，效果1-2小时;必要时或用高锰酸钾-甲醛熏蒸 高

锰酸钾8g/m3，放入耐热耐腐蚀容器(陶罐或玻璃容器)，后参加甲醛(40%)10ml/m3熏蒸4小时以上。熏蒸室内湿度60%-80%。

3整理污染物时:

严厉遵从活病毒生物安全操作要求，选用压力蒸汽灭菌处理，并进行试验室换气等，防止次生损害。一套合格的试验室规划，不外乎以下三点试验室建造

四、试验室布局规划

1、试验室的布局是否合理对教育和科研作业的效果有着直接的联系。试验室(大楼)的布局应有利于教育和科研作业，有利于学科的开展，有利

干各部门的协作，有利干归纳利用和“三废”处理。试验室(大楼)布局的好坏，长时间影响它的作业效率和经济性。

2、试验室的布局是否具有灵活性扩展性

1)还要考虑详细试验作业的特点和要求，使之具有契合需求的试验室运用面积和空间。例如，试验室的高度，要事先考虑到能装置、搬运大型设备。

2)试验室的面积具有较大的灵活性，在布局时不能只考虑当前的需求，还要考虑到将来的开展。

五、试验室根底体系规划

1电力关于现代化试验室来说一般有一些精密、贵重的仪器设备，要求供给稳压、恒流、稳频 抗干扰的电源，还有必要建立不中止供电系

统，还要考虑电源负荷大小考虑往后或许的开展状况留有余地。为方便运用，应在合适的方位预留20V、380V的插座以确保不同仪器设备的正

常运用。

2给排水因为各个试验室的使命、性质不同供水和排水的要求也不一样，有的试验室要求有不间断供水条件有的试验室还有必要对排放的废水进行净化处理。

3、网络结构化归纳布线体系，可以通过一次性布线工程供给各种语音、数据、图画或视频通信体系的通信线路能够满意现在绝大多数通信的

要求。

六、试验室特别体系规划1洁净度

1)不同类型的仪器设备对作业环境的要求是不相同的现代化试验室因为装备较多的高精尖仪器设备对试验室的作业环境提出了更高的要求。

2)假如试验室中的空气含灰尘较多,很简单进入到仪器设备的内部、落在零件的外表上。还有 些是减少微生物污染的，所以要到达一些洁净

度等级。

2、通风

1)许多试验室承担着很多试验使命，因为人数多，试验时间长简单形成试验室内空气污浊，有必要注重试验室的通风换气。

2)特别是化学类试验室、生物、医学类试验室，试验时所运用的化学药品或者试验过程及其产品常常发生一些有害气体对人体晦气。

3)整体试验室的送、回、排风及设备的排风联系到整个试验室的后期运营与保护。

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